我們對于臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞的思考

 　　臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞取自滿月自然分娩的胎兒臍帶，采用無血清人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基純化培養(yǎng)，細(xì)胞含量≥5×106。雖然多個隨機對照臨床試驗證明MSC在臨床應(yīng)用的安全性(無致瘤性)，雖然多個國家已經(jīng)批準(zhǔn)MSC上市;而美國FDA沒有批準(zhǔn)上市，這可能導(dǎo)致了很多人對臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞的安全性依然有顧慮，其實美國FDA不批準(zhǔn)Osiris公司的Prochymal(骨髓MSC)上市，不是出于安全性考慮，而是因為其治療GVHD的III期臨床試驗結(jié)果達不到預(yù)期。

　　所以，我們自然有了對于臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞的一些思考。具體如下：

　　*，臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞是人體所必需存在的一種細(xì)胞類型。目前尚未發(fā)現(xiàn)或證明腫瘤細(xì)胞來源于MSC，甚至有學(xué)者認(rèn)為腫瘤干細(xì)胞不是來源于正常的干細(xì)胞，那么可以認(rèn)為自身體內(nèi)的MSC不會癌變?yōu)槟[瘤細(xì)胞或癌細(xì)胞。至于MSC是否促進腫瘤細(xì)胞的生長?如果沒有免疫系統(tǒng)的存在，MSC分泌豐富的營養(yǎng)性細(xì)胞因子，促進腫瘤細(xì)胞生長的可能性極大。但是機體存在免疫系統(tǒng)的情況下，外源的MSC能否有促瘤作用?免疫系統(tǒng)、間充質(zhì)干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞/癌細(xì)胞，這三者的關(guān)系需要深入研究。

　　第二，臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞不等同于免疫抑制劑。MSC一直廣泛存在于人體中，而且隨機對照臨床試驗證明MSC的應(yīng)用沒有增加感染率，這說明人體里的MSC并沒有發(fā)揮抑制免疫反應(yīng)的作用，免疫抑制功能只是MSC對免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用的其中一個功能。我們現(xiàn)在對MSC免疫功能的認(rèn)知需要進一步的加深。雖然細(xì)胞治療協(xié)會提出免疫調(diào)節(jié)功能分析作為MSC臨床研究的細(xì)胞產(chǎn)品放行標(biāo)準(zhǔn)(或者評價標(biāo)準(zhǔn))，但是這個標(biāo)準(zhǔn)無法量化，不具有可操作性。

　　第三，何種情況適合自體MSC治療。MSC存在于機體多個組織器官，包括骨髓、脂肪、胸腺、外周血等。人體有年齡，組織器官有年齡，干細(xì)胞同樣有年齡。年齡大的MSC的增長速度明顯下降。年齡大的MSC在體外培養(yǎng)時，細(xì)胞的胞體比年青的要大很多。而細(xì)胞胞體的增大與細(xì)胞衰老密切相關(guān)。有證明表面衰老的MSC有三個方面的改變：品質(zhì)下降、分化/再生能力衰減、遷移能力減弱。這部分內(nèi)容的詳細(xì)論述可參考本公眾號《病人自體干細(xì)胞有功能缺陷，不適合自體移植治療》。某種疾病的患者自身MSC會出現(xiàn)某種功能的缺陷，這些功能的缺陷是否嚴(yán)重到影響療效，這依然需要進一步的深入研究。

　　第四，經(jīng)過體外擴增后的MSC的安全性是否等同于體內(nèi)的MSC?未經(jīng)體外擴增的MSC，細(xì)胞本身是安全無害的，除非本身有某種基因缺陷。體外擴增zui大的風(fēng)險在于基因突變。有一研究小組發(fā)現(xiàn)骨髓MSC體外培養(yǎng)至18代時，出現(xiàn)基因突變、染色體異常。另一個研究小組發(fā)現(xiàn)臍帶MSC體外培養(yǎng)至30代才出現(xiàn)染色體異常。我們不能從這兩個研究結(jié)論得出體外培養(yǎng)的骨髓MSC比臍帶MSC更容易出現(xiàn)染色體異常，因為培養(yǎng)體系可能不一樣;但也能說明MSC在體外培養(yǎng)代數(shù)過高(超過10代)的情況下才會引起染色體異常。

　　第五，異體MSC進入體內(nèi)的代謝。目前關(guān)于MSC在機體里的代謝動力學(xué)認(rèn)知均來源于動物實驗。由于MSC具有趨化到損傷的組織器官部位的特性，那么MSC在健康機體和疾病機體兩種狀態(tài)下的代謝動力學(xué)是不大一樣的。MSC來源也是一個影響因素，比如骨髓MSC的細(xì)胞體積大于臍帶血MSC，導(dǎo)致骨髓MSC在肺部的滯留多于臍帶血MSC。實驗動物的物種也會影響MSC的代謝動力學(xué)，比如沒有肺部損傷的狗，MSC在肺部停留的時間約1天，但是MSC可在健康的大鼠肺部停留3天;給予大鼠肺部放射性損傷后，MSC在肺部停留時間延長只7天[26]。有研究顯示MSC在肺部的滯留，肺部環(huán)境能激活MSC表達TSG-6，有利于MSC發(fā)揮治療作用。MSC經(jīng)過肺部后，會隨時血液循環(huán)到達其他器官，比如肝、腎、脾等。異體MSC在免疫系統(tǒng)健全的小鼠體內(nèi)的存活時間大約是22天，MSC在小鼠體內(nèi)的存活時間和小鼠的免疫細(xì)胞的缺陷程度成反比，即MSC在NOD/SCID小鼠的存活時間zui長，Nude裸鼠次之，正常健康小鼠zui短。

　　第六，適應(yīng)癥的選擇。由于臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞廣泛存在于人體，那么人體出現(xiàn)的所有疾病，是否都可以應(yīng)用MSC來治療?在clinicaltrials登記注冊的MSC臨床試驗(I-III期)的病種或適應(yīng)癥有數(shù)十種，其中不少已經(jīng)發(fā)表了臨床研究的結(jié)果。那么MSC治療的適應(yīng)癥的選擇依據(jù)是什么?MSC的干細(xì)胞生物學(xué)功能決定了MSC的療效(治療方案也很重要)，因此，深入研究MSC的功能顯得非常重要。早期認(rèn)為MSC的分化功能適合用來治療某種疾病，但是MSC的治療機理更可能在于分泌細(xì)胞因子。但是目前還沒有數(shù)據(jù)或文章支持生物活性分子組合可以取代MSC來治療疾病;而且MSC的一些優(yōu)點是生物活性分子所不具有的，比如低免疫原性、趨化聚集到損傷的局部位置、與組織器官的細(xì)胞與細(xì)胞間的交流(cell-cell crosstalk)等。

　　綜上所述，雖然MSC已經(jīng)被一些國家批準(zhǔn)上市，安全性和有效性得到和市場的認(rèn)可;但是，上市并不意味著對MSC研究的終止。臍帶MSC間充質(zhì)干細(xì)胞的迷人在于她總能給我們一些驚喜，我們要做的就是研究這些驚喜背后的謎團。